ПЦР-Гид
Бренд: Life Technologies
Руководство по применению ПЦР
ПЦР включает несколько стадий: 1) денатурация ДНК, 2) отжиг праймеров и 3) синтез ДНК и осуществляется в термоциклерах (амплификаторах). ПЦР является чрезвычайно эффективным методом, обладающим высокой специфичностью и позволяющим получать свыше 10 млн. копий целевой ДНК из нескольких молекул. Поскольку ПЦР в то же время является сложным методом, очень важно выбрать высококачественные приборы, реактивы и расходные материалы для получения оптимальных результатов.
С момента появления первых термоциклеров в 1987 году Applied Biosystems (в настоящее время часть корпорации Life Technologies) продолжает разрабатывать новые ПЦР-реагенты и инструменты для различных исследований в области молекулярной биологии.
| Применение | Возможности | Рекомендуемые реагенты |
|---|---|---|
| Клонирование | Конструирование кДНК-библиотек;
Описание генных семейств; Широкомасштабное картирование генома с использованием BACs/YACs; | AmpliTaq® 360 DNA Polymerase;
AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase; GeneAmp® High Fidelity PCR System. |
| Анализ экспрессии | RACE-анализ для амплификации
неизвестной кДНК; Дифференциальное обнаружение; Детекция редких транскриптов; Количественная экспрессия генов. | GeneAmp® Gold RNA PCR Kit;
High Capacity RNA-to-cDNA Master Mix; High Capacity RNA-to-CDNA Kit. |
| Генотипирование | Аллель-специфическая ПЦР;
Полиморфизм длины амплифицированных фрагментов; Гаплотипирование; ПЦР с эмульсионной связью; Анализ SNPs; Исследование микросателлитов. | AmpliTaq® 360 DNA Polymerase;
AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase. |
| Случайный и направленный мутагенез | Структурно-функциональные связи белков,
РНК и ДНК; Белковая инженерия; Добавление уникальных сайтов рестрикции; Конструирование ДНК-библиотек. | GeneAmp® High Fidelity PCR System |
| Секвенирование | Детекция мутаций;
Анализ генов-кандидатов; Исследование генетических связей; Эволюционные исследования; Геномное секвенирование; Прогулка по хромосоме. | AmpliTaq® 360 DNA Polymerase;
AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase; AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP; GeneAmp® High Fidelity PCR System. |
| Амплификация бактериальных генов | Детекция патогенов;
AFLP-анализ для сравнительной бактериальной геномики. | AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP |
| Амплификация вирусных генов | NASBA;
Детекция патогенов. | AmpliTaq® 360 DNA Polymerase.
AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase. |
| Амплификация длинных фрагментов (5000 – 20000 пар оснований) | Картирование генов;
Амплификация генома митохондрий; Изучение кластеров генов; Клонирование длинных транскриптов кДНК. | GeneAmp® High Fidelity PCR System. |
| Мультиплексная ПЦР | Идентификация личности;
Исследование VNTRs. | AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase. |
| ПЦР в быстром режиме | Высокопроизводительный скрининг;
Скрининг ПЦР-библиотек; Быстрое генотипирование трансгенных животных. | GeneAmp® Fast PCR Master Mix;
AmpliTaq® Gold Fast PCR Master Mix, UP. |
Для всех применений кроме ПЦР в быстром режиме совместимыми термоциклерами (амплификаторами) являются модели 2720, 9700 и Veriti.
Для ПЦР в быстром режиме совместимыми термоциклерами (амплификаторами) являются модели 96-ти луночный Veriti Fast и 96-ти луночный Veriti (при использовании соответствующей химии).